I.Sを用いた免疫電顕(ポストエンベディング法)
用意するもの @ マイクロウェーブ装置
A ホールスライドグラス
B スライドグラス
C 脱樹脂用薬剤(ex.10%過ヨウ素酸ナトリウム)
D ドウゼ
E セロテープ
( F グリッドスティック )
【方法】
1. 超薄切片の脱樹脂 例:グリッドをスティックに貼り付けた状態で10%過ヨウ
素酸ナトリウムに約30分浸漬してエッチングをする
2. 200倍希釈のI.Sで洗浄(蒸留水でも可)
3. ホールスライドグラスのホールに200倍希釈のI.Sが十分に満たされるように数滴
滴下する
4. グリッドをホール内のI.S液に浸漬する
5. 平面なスライドグラスを重ね、テープ等でシールする
6. ドウゼに200倍希釈のI.Sを50ml程入れ、マイクロウェーブで95℃まで加温する
(あらかじめ加温しておく方が良い)
7. グリッドをセットしたスライドグラスを加温したドウゼに浸す。
8. 250W、95℃で15分間、間欠照射(5分ON3回、2秒OFF2回)
9. 30分室温で放置する
10. 電顕の免疫染色
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